Содержание
Окрашивание по Граму, или просто по Граму, - это быстрый и простой метод, направленный на дифференциацию бактерий в соответствии с характеристиками их клеточной стенки после воздействия различных красителей и растворов.
Таким образом, с помощью окрашивания по Граму можно проверить, помимо формы бактерий, цвет, который они приобретают, и этот результат важен для определения других стратегий идентификации видов бактерий и для того, чтобы врач указал профилактическое лечение в соответствии с микроскопически наблюдаемые характеристики.
Окрашивание по Граму обычно проводится в лаборатории и является частью бактериоскопического исследования. Разберитесь, что такое бактериоскопия и как ее проводят.
Как делается окраска по Граму
Окрашивание по Граму - это быстрый, практичный и недорогой метод выявления бактерий, ответственных за инфекции, полезный для врачей для указания профилактического лечения инфекции, которая может возникнуть, поскольку известны конкретные характеристики этих групп бактерий,
Окрашивание по Граму выполняется в 7 основных этапов, однако протокол может варьироваться в зависимости от лаборатории:
- Поместите несколько колоний бактерий на предметное стекло, добавив каплю воды для облегчения гомогенизации колоний;
- Дайте ему немного высохнуть, и лезвие сможет быстро пройти сквозь пламя, чтобы способствовать высыханию, однако важно обращать внимание на температуру, поскольку при слишком высокой температуре возможно изменение структуры бактерий, что может повлиять на результат. экзамен;
- Когда слайд высохнет, накройте его фиолетовым кристаллическим красителем и дайте ему подействовать примерно на 1 минуту;
- Промойте предметное стекло струей проточной воды и накройте предметное стекло люголем, который фиксирует синий краситель, и дайте ему подействовать в течение 1 минуты. Оба типа бактерий могут поглощать комплекс, образованный красителем и люголем, становясь синим;
- Затем промойте предметное стекло проточной водой и нанесите 95% спирт, оставив действовать на 30 секунд. Спирт отвечает за растворение липидной мембраны, которая образует грамотрицательные бактерии, и, таким образом, за удаление комплекса, образовавшегося между красителем и люголем, обесцвечивания этих бактерий. Однако в случае грамположительных бактерий алкоголь обезвоживает клеточную стенку грамположительных бактерий, вызывая сужение пор и делая их непроницаемыми;
- Затем снова промойте в проточной воде и покройте предметное стекло вторым красителем, фуксином или сафранином и дайте ему подействовать в течение 30 секунд;
- Затем промойте предметное стекло под проточной водой и дайте ему высохнуть при комнатной температуре.
Как только предметное стекло высохнет, можно нанести каплю иммерсионного масла и наблюдать за предметным стеклом под микроскопом с 100-кратным увеличением, что позволяет проверить наличие или отсутствие бактерий, а также наличие дрожжей и эпителиальных клеток.
Для чего это
Окрашивание по Граму имеет основную цель - дифференцировать бактерии в соответствии с характеристиками клеточной стенки и общей морфологией. Таким образом, по характеристикам, наблюдаемым под микроскопом, бактерии можно разделить на:
- Грамположительные бактерии, которые визуализируются синим цветом из-за того, что они не обесцвечиваются алкоголем, так как у них более толстая клеточная стенка и их поры сужаются при воздействии люголя;
- Грамотрицательные бактерии, которые визуализируются розовым / пурпурным цветом из-за того, что они обесцвечиваются спиртом и окрашиваются сафранином или фуксином.
После просмотра бактерий под микроскопом возможно, что в лаборатории будут проведены дальнейшие тесты для определения вида бактерий. Однако с помощью Грама и ассоциации с признаками и симптомами, представленными человеком, врач может указать профилактическое лечение до тех пор, пока не станут доступны результаты более конкретных исследований, поскольку таким образом можно снизить скорость размножения бактерий и предотвратить осложнения.